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    食品伙伴网服务号

    【汇总】微生物实验室消毒处理方法!

    放大字体  缩小字体 发布日期:2021-10-11  浏览次数:662
    核心提示:一、无菌室1.紫外线消毒①在室温20℃~25℃时,220V 30W紫外灯下方垂直位置1.0m处的253.7mm紫外线辐射强度应70uW/cm2,低于此值时应
     一、无菌室

     

    1.紫外线消毒

    ①在室温20℃~25℃时,220V 30W紫外灯下方垂直位置1.0m处的253.7mm紫外线辐射强度应≥70uW/cm2,低于此值时应更换。适当数量的紫外灯,确保平均每立方米应不少于1.5W。

    ②紫外线消毒时,无菌室内应保持清洁干燥。

    ③在无人条件下,可采取紫外线消毒,作用时间应≥30min。室内温度<20℃或>40℃、相对湿度大于60%时,应适当延长照射时间。

    ④用紫外线消毒物品表面时,应使照射表面受到紫外线的直接照射,且应达到足够的照射剂量。

    ⑤人员在关闭紫外灯至少30min后方可入内作业。

    ⑥按照GB15981的规定,评价紫外线的消毒与杀菌效果。

     

    2.臭氧消毒

    ①封闭无菌室内,无人条件下,采用20mg/m3浓度的臭氧,作用时间应≥30min。消毒后室内臭氧浓度≤0.2mg/m3时方可入内作业。

    ②按照GB/T18202的规定,检测室内臭氧的浓度。

     

    3.无菌室空气灭菌效果验证方法(沉降法)

    ①在消毒处理后与开展检验活动之前期间采样。

    ②取样位点的选择应基于人员流量情况和做试验的频率。一般情况下,无菌室面积≤30m2时,从所设定的一条对角线上选取3点,即中心1点、两端各距墙1m处各取1点;无菌室面积≥30m2时,选取东、南、西、北、中5点,其中东点、南点、西点、北点均距端1m。

    ③在所选位点,将平板计数琼脂平板(90mm)或水化3 M Petrifilm菌落总数测试片置于距地面80cm处,开盖暴露15min,然后,置于36℃士1℃恒温箱培养48h土1h。如果侦查某目标细菌,则可用选择性琼脂平板(如PDA平板)或微生物测试片(如3 M Petrifilm环境李斯特氏菌测试片)。

    ④确认平板上的菌落数,如大于所设定的风险值,应分析原因,并采取适当措施。

     

    二、培养基和试剂


     

    1.培养基通常应采用高压湿热灭菌法,121℃灭15min,特殊培养基按使用者的特殊要求进行灭菌(如含糖培养基,115℃灭菌20min)。

     

    2.部分培养基(如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养基等),只能煮沸灭菌。

     

    3.对热敏感的培养基或添加物质,应采用膜过滤方法进行过滤除菌。

     

    4.即用型试剂不需灭菌,应参见相关国际标准或供应商使用说明,直接使用。

     

    三、器具和设备


     

    1.湿热灭菌:采用高压灭器,121℃灭菌20min,适用于玻璃器皿、移液器吸头、塑料瓶等,按照GB15981的规定,评价高压灭菌器的杀菌效果。

     

    2.干热灭菌:采用干燥箱灭菌,160℃灭菌2h,180℃灭菌1h,适用于玻璃器皿,不锈锅器具等。

     

    3.液体消毒剂消毒:使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂(参见表D.1)对工作台面、器具或设备表面进行消毒。可按照GB15981的规定,评价自配或商业消毒剂的消毒效果可按照ISO18593,监测工作台面、器具或设备表面的消毒效果。

     

     表D.1

     

     

    四、实验室废弃物


     

    1.对于培养物及其污染的物品(如斜面、api20E测试条、api20NE测试条、生物鉴定管、血清学鉴定用载玻片、mini- VIDAS测试条、用过的移液器吸头、细菌培养平皿、注射器等),应使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂(参见表D.1)对处理后一定时间,或121℃高压灭菌至少30min,或者其他有效处理措施。将处理物倒入特殊标识的垃圾袋内,直接送到指定地点。

    2.对于实验动物尸体及相关废弃物,按照GB14925的规定进行处理。

    3.记录并保留废弃物和实验动物尸体处理的记录。

     

    编辑:songjiajie2010

     
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