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    食品伙伴网服务号

    【微生物】浮游菌检测标准操作规程!

    放大字体  缩小字体 发布日期:2022-02-15  浏览次数:441
    核心提示:1. 取样前准备工作1.1 依据检测区域的取样点数,按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。1.2 在超净工作
     1. 取样前准备工作

     

    1.1 依据检测区域的取样点数,按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。
    1.2 在超净工作台内,以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15mL的装量分装,待培养基凝固后移出洁净区。
    1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30~35℃培养48小时。取出逐个检查,确认无菌落数后即可使用。
    1.4 采样:将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。

    2. 仪器、设备和培养基

    2.1 所用的仪器、设备和培养基
    2.1.2 浮游菌采样器
    2.1.3 培养皿(φ90mm×15mm)
    2.1.4 培养基(营养琼脂培养基)
    2.1.5 恒温培养箱

    2.2  仪器、设备、培养基的要求
    浮游菌采样器
    2.2.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。
    2.2.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。
    2.2.3 采样器必须按仪器的检定周期,定期对仪器作检定,以保证测试数据的可靠性,检验项目有:定时器,转盘转速,流量计。
    2.2.4 每次测试前应先接通电源,启动真空抽气泵,然后调节流量计和定时器。
    2.2.5 空气采样量根据需要选定,已知采样器的流量(L/min),设定采样时间(min)两者相乘即得采样量(L)。
    2.2.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造,采样管严禁渗漏,内壁应光滑,采样管的长度应根据测定点的高度定,尽量减少弯曲。

    3. 测试方法

    3.1  测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。
    3.1.1  采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。
    3.1.2  用消毒剂擦净培养皿的外表面。
    3.1.3  采样前,先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面,采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。
    3.1.4  采样口及采样管使用前必须高温灭菌,如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒,应将管中的残留液倒掉并晾干。
    3.1.5  采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒。

    3.2  采样程序
    3.2.1  仪器经消毒后先不放入培养皿,开动真空泵抽气,使仪器的残余消毒剂蒸发,时间不少于5min,并调好流量、转盘转速。
    3.2.2  关闭真空泵,放入培养皿,盖上盖子后调节采样品缝隙高度。
    3.2.3  置采样器于采样点后,开启采样器、转动定时器,根据采样量设定采样时间。

    4. 测试规则

    4.1 测试状态
    4.1.1  浮游菌测试前微生物限度检查室已经消毒过。
    4.1.2  测试状态为静态测试,并在报告中注明测试状态。

    4.2 测试人员
    4.2.1  测试人员必须穿戴符和被测环境级别的工作服。
    4.2.2  静态测试时,室内人员不得多于2人。

    4.3 测试时间
    4.3.1  对单向流,测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。
    4.3.2  对非单向流,测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。

    4.4  最少采样点数目及其布置,最小采样量,见下表:

     

    4.4.1  工作区测点位置离地0.8m~1.5m左右,送风口测点位置离开送风面30cm左右;可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
    4.4.2  每个采样点一般采样一次。
    4.4.3  对于单向流或送风口,采样器采样管口朝向应正对气流方向;对于非单向流,采样管口向上。
    4.4.4  布置采样点时,至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。
    4.4.5  采样时,测试人员应站在采样口的下风侧。

    5. 培养
    取样结束后将平皿复倒置隔水式恒温水浴培养箱内于30~35℃培养48小时。并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。

    6. 菌落计数

    6.1 用肉眼直接计数,然后用5-10倍放大镜检查,是否遗漏。
    6.2 若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠,可分辨时,仍以2个或2个以上的菌落计数。计数:培养结束,将上述培养后的平皿取出,逐个点计菌落数,必要时用放大镜检查,并记录。 

    7. 结果计算

    7.1 平均菌落数的计算见下式:

     

    式中:m 为该房间(或区域)的平均菌落数;
              m1、m2‥‥‥mn 为该房间(或区域)各取样点的菌落数;
              N 为培养皿总数。

    8. 结论

    8.1 洁净室(区)内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。
    8.2 若某洁净室(区)的平均菌落数超过评定标准,则必须对此区域先行消毒,然后重新测试两次,测试结果必须合格。

     

    编辑:songjiajie2010

     
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    关键词: 操作规程 标准
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